Microscopie de super-résolution

Informations générales

• Type : Stage
• Thème : Microscopie et imagerie
• Compétences visées : Enseignement

Objectifs

Acquérir les bases théoriques des pratiques en microscopie de super-résolution et s’initier aux méthodes d’analyses :

* Microscopie de déplétion par émission stimulée : STED
* Microscopie par localisation de molécules uniques (SMLM) : (spt)PALM, (d)STORM et (u/DNA)-PAINT
* Analyse d’images

Programme

Cours théoriques :

* Présentation générale des techniques de super-résolution : STED et SMLM
* Description du montage expérimental
* Intérêts, avantages et limites de chaque technique
* Sondes fluorescentes et stratégies de marquage pour la super-résolution
* Autres techniques de super résolution : Microscopie d’expansion, iSIM, ISM, AiryScan, et SRRF
* Techniques de super résolution utilisant une illumination par feuille de lumière




Séminaires d’application :Présentations scientifiques d‘applications biologiques par
des utilisateurs avancés des certaines techniques de super-résolution


Phase pratique : Pour les techniques, d’Expansion, de STED et de SMLM, des TP de
2h permettront de renforcer le lien entre théorie et application sur différents
échantillons biologiques. Des systèmes de laboratoire et commerciaux seront mis à
disposition. Des démos seront aussi proposées au choix sur les techniques alternatives
de super-résolution.
Systèmes à disposition :

* 1 microscope STED : système commercial avec 3 lasers de déplétion (Leica), combinant l’analyse de durée de vie de fluorescence (Tau STED)
* 3 microscopes PALM/dSTORM : 1 (spt)PALM et 1 dSTORM de laboratoire, 1 GSD commercial (Leica)




Analyse d’images : Une session de présentation de logiciels permettant de faire de
la colocalisation et de l’analyse d’images est proposée.


Table ronde et discussion : La formation se terminera par une table rondediscussion


Test sur échantillons : Journée optionnelle dédiée aux échantillons des participants
sur l’ensemble des systèmes mis à disposition (nous contacter)

Pré-requis

Avoir de bonnes connaissances
théoriques et pratiques en
microscopie de fluorescence

Informations utiles

Programme alternant théorie et pratique personnalisée avec mise en application sur
les échantillons ou les images des participants